{"id":2066,"date":"2020-06-06T10:44:29","date_gmt":"2020-06-06T08:44:29","guid":{"rendered":"http:\/\/bioclips.info\/?page_id=2066"},"modified":"2020-06-06T10:47:25","modified_gmt":"2020-06-06T08:47:25","slug":"genfaehren-vektor","status":"publish","type":"page","link":"https:\/\/bioclips.info\/?page_id=2066","title":{"rendered":"Genf\u00e4hren &#8211; Vektor"},"content":{"rendered":"\n<p>Um fremde Gene oder DNA-Fragmente in Zellen einschleusen zu k\u00f6nnen, ben\u00f6tigt man \u00dcbertr\u00e4ger (Genf\u00e4hre oder Vektor). H\u00e4ufig kommen Plasmide zu Anwendung.<\/p>\n\n\n\n<h2 class=\"wp-block-heading\">Worum gehts?<\/h2>\n\n\n\n<p>Welche Eigenschaften sollte ein Plasmid haben, wenn es als Vektor genutzt werden soll?<\/p>\n\n\n\n<h2 class=\"wp-block-heading\">Vektoreigenschaften von Plasmiden<\/h2>\n\n\n\n<p>Ein Plasmid eignet sich als Vektor, wenn es folgende Eigenschaften hat:<\/p>\n\n\n\n<ul><li>Es muss sich m\u00f6glichst einfach durch Dichtegradientenzentrifugation isolieren lassen.<\/li><li>Es muss eine Replikationsstartstelle (ori von \u201eorigin of replication\u201c) besitzen, um sich eigenst\u00e4ndig replizieren zu k\u00f6nnen.<\/li><li>Es sollte nicht zu gro\u00df sein (weniger als 10 000 Basenpaare)<\/li><li>Es muss geeignete Schnittstellen f\u00fcr Restriktionsenzyme besitzen, um den Einbau von Fremd-DNA zu erm\u00f6glichen.<\/li><li>Es muss der Empf\u00e4ngerzelle einen selektiven Vorteil verschaffen, damit man rekombinierte Zellen von nicht rekombinierten Zellen unterscheiden kann. Daf\u00fcr eignen sich besonders Antibiotika-Resistenz-Gene.<\/li><li>Es muss ein Operon vorhanden sein, um Gene zu exprimieren. Der Promotor als Bestandteil des Operons macht die Anlagerung einer Polymerase m\u00f6glich, mit dem Operator l\u00e4sst sich die Genexpression zu kontrollieren. Hier kommen z.B. Das Lactose-Operon oder das Tryptophan-Operon zum Einsatz<\/li><\/ul>\n\n\n\n<p>In der Gentechnik werden nat\u00fcrliche und konstruierte Plasmide verwendet, die aus nat\u00fcrlichen Plasmiden hervorgehen. In die konstruierten Plasmide baut man dann die gew\u00fcnschten Gene, eine Replikationsstartstelle, Antibiotika-Resistenzgene und Schnittstellen f\u00fcr mehrere Restriktionsenzyme ein.<\/p>\n\n\n\n<h3 class=\"wp-block-heading\">Das Plasmid pBR 322<\/h3>\n\n\n\n<p>pBR 322 wurde Ende der 70-iger Jahre von den Wissenschaftlern Bolivar und Rodriquez entwickelt<\/p>\n\n\n\n<ol type=\"a\"><li>ori, Startstelle f\u00fcr die Replikation<\/li><li>Gen f\u00fcr Ampicillinresistenz<\/li><li>Gen f\u00fcr Tetracyclinresistenz<\/li><\/ol>\n\n\n\n<div class=\"wp-block-image\"><figure class=\"aligncenter size-large\"><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" width=\"330\" height=\"322\" src=\"https:\/\/bioclips.info\/wp-content\/uploads\/2020\/06\/vector-img1.jpg\" alt=\"\" class=\"wp-image-2069\" srcset=\"https:\/\/bioclips.info\/wp-content\/uploads\/2020\/06\/vector-img1.jpg 330w, https:\/\/bioclips.info\/wp-content\/uploads\/2020\/06\/vector-img1-300x293.jpg 300w\" sizes=\"(max-width: 330px) 100vw, 330px\" \/><\/figure><\/div>\n\n\n\n<p>Restriktionsenzym \u2013 Schnittstellen<\/p>\n\n\n\n<ol type=\"1\"><li>Pst I<\/li><li>Eco RI<\/li><li>Hind III<\/li><li>BamH I<\/li><\/ol>\n\n\n\n<p>Fremd-DNA kann nicht in alle Empf\u00e4ngerorganismen durch Plasmide \u00fcbertragen werden. Es wurden deshalb f\u00fcr pflanzliche, tierische und menschliche Zellen andere Vektoren entwickelt, wie beispielsweise Adenoviren f\u00fcr Cystische Fibrose.<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Um fremde Gene oder DNA-Fragmente in Zellen einschleusen zu k\u00f6nnen, ben\u00f6tigt man \u00dcbertr\u00e4ger (Genf\u00e4hre oder Vektor). H\u00e4ufig kommen Plasmide zu Anwendung. Worum gehts? Welche Eigenschaften sollte ein Plasmid haben, wenn es als Vektor genutzt werden soll? 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