{"id":2034,"date":"2020-06-06T09:22:56","date_gmt":"2020-06-06T07:22:56","guid":{"rendered":"http:\/\/bioclips.info\/?page_id=2034"},"modified":"2021-03-20T11:48:20","modified_gmt":"2021-03-20T10:48:20","slug":"gelelektrophorese","status":"publish","type":"page","link":"https:\/\/bioclips.info\/?page_id=2034","title":{"rendered":"Gelelektrophorese"},"content":{"rendered":"\n

Wenn Wissenschaftler DNA-Proben untersuchen m\u00f6chten, die DNA-Fragmente unterschiedlicher L\u00e4nge enthalten, dann verwenden sie die Gelelektrophorese. Mit dieser Metohde lassen sich die Fragmente ihrer Gr\u00f6\u00dfe nach trennen und anschlie\u00dfend durch F\u00e4rbung sichtbar machen. Dabei enstehen Muster, die man nach der entsprechenden Zielsetzung auswerten kann.<\/p>\n\n\n\n

\"\" Worum gehts?<\/h2>\n\n\n\n

Wie lassen sich mit der Gelelektrophorese Molek\u00fclgemische der Gr\u00f6\u00dfe nach auftrennen und darstellen?<\/p>\n\n\n\n

Agarosegel<\/h2>\n\n\n\n
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  • Als erstes ben\u00f6tigt man etwas zum Trennen der unterschiedlich gro\u00dfen Molek\u00fcle.<\/li>
  • H\u00e4ufig verwendet wird das Polysaccharid Agarose, das aus Meeresalgen gewonnen wird.<\/li>
  • Durch Aufkochen von Agarose erh\u00e4lt man ein Agarosegel.<\/li>
  • Durch Ausgie\u00dfen und Abk\u00fchlen entsteht ein 6 mm flaches Gel (Konsistenz von G\u00f6tterspeise).<\/li>
  • Vor dem Abk\u00fchlen wird an einem Ende ein Kamm eingeschoben, der nach dem Aush\u00e4rten wieder entfernt wird, dadurch entstehen Vertiefungen (a<\/strong>: Probetaschen), die sich beispielsweise mit DNA-<\/li><\/ul>\n<\/div><\/div>\n\n\n\n

    Ger\u00e4t zur Durchf\u00fchrung der Gelelektrophorese<\/h2>\n\n\n\n
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    • Die Abbildung zeigt ein Ger\u00e4t zur Durchf\u00fchrung der Agarose-Gelelektrophorese
      • Rot: Pluspol (Anode)<\/li>
      • Schwarz: Minuspol (Katode)<\/li><\/ul><\/li>
      • Die Trennung der DNA-Fragmente erfolgt mithilfe eines elektrischen Feldes.<\/li>
      • Das Gel befindet sich in einer Kammer mit einer positiven und negativen Elektrode.<\/li>
      • Durch Anlegen einer elektrischen Spannung wandern die DNA-Fragmente durch das elektrische Feld.<\/li>
      • Da das Phosphatr\u00fcckgrat der DNA negativ geladen ist, wandern die Fragmente zum Pluspol (Anode: rotes Kabel).<\/li><\/ul>\n<\/div><\/div>\n\n\n\n

        Agarosegel nach der Gelelektrophorese<\/h2>\n\n\n\n
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        • Die unterschiedlich gro\u00dfen DNA-Fragmente k\u00f6nnen die L\u00fccken im Agarosegel mit unterschiedlicher Geschwindigkeit passieren, so dass es zu Auftrennung kommt.<\/li>
        • Kleine Molek\u00fcle bewegen sich schneller, gr\u00f6\u00dfere langsamer durch das Gel.<\/li>
        • Anschlie\u00dfend wird das Gel in Ethidiumbromid getaucht, um die Nucleins\u00e4uren im UV-Licht sichtbar zu machen.<\/li>
        • DNA-Molek\u00fcle gleicher Gr\u00f6\u00dfe bilden in der Regel eine scharfe Bande (c<\/strong>).<\/li>
        • Die Gr\u00f6\u00dfe der Molek\u00fcle l\u00e4sst sich mit einem mitlaufenden Molek\u00fclmassenstandard (b:<\/strong> Standard-DNA-Fragmente) absch\u00e4tzen.<\/li>
        • Die Bandenmuster stehen einer Analyse zur Verf\u00fcgung.<\/li><\/ul>\n<\/div><\/div>\n\n\n\n

          Simulation der Gelelektrophorese<\/h2>\n\n\n\n
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